样品稀释仪的维护与校准方法详解

　　样品稀释仪是现代实验室自动化流程中的关键设备，广泛应用于生命科学、临床诊断、食品安全和环境监测等领域。其核心使命是将高浓度的原始样品，按照预设的比例，自动、快速、精确地稀释至目标浓度，为后续的色谱分析、质谱检测、ELISA实验或细胞培养等提供合格的样本。
 

　　“垃圾进，垃圾出”是分析测试的黄金法则。稀释仪作为样品制备的“第一道关口”，其工作的准确性和可靠性直接决定了整个实验数据的质量。一个未经良好维护或校准的稀释仪，即使是微小的体积误差或携带污染，都可能导致批次实验的失败、错误的结论，甚至在临床诊断中引发严重后果。因此，建立一套科学、规范的维护与校准体系，并非可有可无的“家务活”，而是保障实验室数据完整性、确保实验结果可追溯和可信赖的战略性举措。本文将系统性地详解样品稀释仪的维护与校准方法，旨在为实验室管理者和操作人员提供一份全面、实用的行动指南。
 

　　一、 维护篇：预防性保养，防患于未然
 

　　维护的核心思想是预防性保养，通过日常的、周期性的清洁和检查，保持设备处于最佳工作状态，将故障和性能衰退的风险降至低。
 

　　1. 日常维护：每次使用前后的“必修课”
 

　　清洁与消毒：
 

　　外部清洁：每次使用后，使用无绒布和70%异丙醇或合适的实验室级消毒剂擦拭设备外壳、操作面板和样品舱，防止交叉污染。
 

　　管路与枪头锥清洁：这是日常维护的重中之重。
 

　　执行清洗程序：绝大多数稀释仪都内置了清洗程序。务必在每批次样品处理前后，严格执行该程序。通常使用去离子水、稀酸(如0.1M HCl，用于去除无机盐残留)或稀碱(如0.1M NaOH，用于去除有机物残留)作为清洗液，通过正压或负压冲洗整个液体通路。
 

　　手动冲洗：对于关键或易受污染的应用，建议在自动清洗程序后，再进行一到两次手动冲洗。
 

　　使用兼容耗材：务必使用厂家推荐的或经过验证的兼容枪头锥(Tip Cone)和移液枪头，劣质耗材是导致泄漏和污染的常见原因。
 

　　废液处理：及时清空废液瓶，并按生物安全和化学品安全的规定妥善处理废液，防止溢出或产生有害气体。
 

　　目视检查：检查电源线、数据线是否连接牢固，设备有无异常声响或报警。
 

　　2. 每周/每月维护：深度清洁与检查
 

　　管路与阀组的深度清洁：对于处理粘稠、易结晶或含有颗粒物的样品后，即使执行了日常清洗，也应进行更深度的清洁。
 

　　浸泡清洗：将可拆卸的管路、阀门等浸泡在适当的清洗液中(如酶清洁剂用于生物样品，有机溶剂用于油脂类样品)，一段时间后用纯净水冲洗干净。
 

　　注意：此方法需参考设备手册，避免损坏敏感部件。
 

　　滤芯更换：如果设备配备了用于过滤空气或样品的滤芯(如疏水滤芯)，应根据使用频率和水质情况，定期(如每月或每季度)检查其污染情况，并及时更换。
 

　　润滑：对于带有机械运动部件(如注射器推杆)的设备，需按手册要求，定期使用指定的润滑剂进行润滑，确保其运动顺滑、无阻滞。
 

　　校准状态核查：回顾近期的校准记录，确认设备在校准有效期内。如发现设备运行异常(如重复性变差)，应考虑提前进行校准。
 

　　3. 年度/按需维护：专业级保养
 

　　全面检修：联系厂家或授权的专业工程师进行全面的预防性维护。这可能包括：
 

　　拆解并清洁核心部件，如注射泵、旋转阀的内部腔室。
 

　　检查和更换老化的密封圈、垫圈，这是防止泄漏的关键。
 

　　检查和校准内部传感器(如液位传感器、压力传感器)。
 

　　更新设备固件和软件。
 

　　关键部件更换：根据部件的使用寿命和实际磨损情况，有计划地更换高损耗件，如注射器、管路、密封圈等。
  

　　二、 校准篇：确保数据溯源，捍卫数据完整性
 

　　校准是通过使用标准物质来验证和调整设备性能，使其测量结果与国家或国际标准保持一致的可追溯过程。
 

　　1. 校准前的准备
 

　　标准器：
 

　　容量校准：需要一套经过法定计量机构检定合格的高精度微量天平(精度至少达到0.01mg)和与之匹配的校准砝码。
 

　　移液精度与重复性校准：需要使用高纯度的去离子水或密度已知的校准液。
 

　　环境控制：将设备和天平放置在稳定的环境中，避免温度、湿度和气流的剧烈波动，因为这些因素都会影响称量和液体体积的精度。
 

　　文档准备：准备好校准记录表，明确本次校准的依据(如JJF 1815-2020 《液液萃取/稀释仪校准规范》或设备厂商的推荐规程)、校准项目和可接受标准。
 

　　2. 关键参数的校准方法与可接受标准

序号	校准项目	校准方法与步骤	可接受标准（示例，需参照具体标准和厂商规格）
1​	容量/体积准确性​	称重法： 1. 将一个洁净干燥的容器放在天平上，去皮归零。 2. 使用稀释仪的最大和最小量程，分别吸取一定量的去离子水（如100μL, 500μL, 1000μL）至容器中。 3. 记录天平显示的水的质量。 4. 根据水的密度（在校准温度下）将质量换算为体积。 5. 重复测量3-5次，计算每个体积点的平均值和误差。	准确性：误差 ≤ ±0.5% (或符合厂商规格，如±1%)。 线性：在全量程范围内的误差应符合要求。
2​	移液精度（精密度）​	重复性测试： 1. 选择一个中等体积点（如500μL）。 2. 使用同一支枪头，连续进行10-15次吸取-排放循环，每次都将液体排入同一个容器。 3. 称量每次排放的质量，并换算为体积。 4. 计算这组数据的标准偏差（SD）和相对标准偏差（RSD%）。	RSD% ≤ 1%​ (对于大多数应用，高精度设备要求 ≤ 0.5%)。
3​	携带污染率​	交叉污染测试： 1. 先吸取一个高浓度样品（或染色液）至废液杯。 2. 立即执行清洗程序。 3. 再吸取等量的去离子水或空白溶剂。 4. 通过光谱法（如紫外分光光度计）或目视检查第二次吸取的液体中是否存在第一次样品的残留信号或颜色。	携带污染率 ≤ 0.1%​ (或低于方法检出限)。无任何肉眼可见的交叉污染。
4​	稀释准确性​	终点浓度法： 1. 配制一个已知准确浓度的母液。 2. 使用稀释仪，按照设定的稀释比例（如1:10, 1:100）进行稀释。 3. 使用独立的、经过校准的分析方法（如HPLC, UV-Vis）测定稀释后样品的实际浓度。 4. 将实测浓度与理论浓度进行比较。	相对误差 ≤ ±1%​ (取决于应用要求)。
5​	软件与计时功能​	计时核查：使用独立的秒表，核对设备运行预设程序的时间是否准确。	时间误差 ≤ ±1%。

 

　　3. 校准结果与处理
 

　　所有校准数据必须如实、详细地记录在案，并由校准人员签字确认。
 

　　如果所有参数均在可接受标准内，则出具校准证书，证明设备在该时间点性能符合要求。
 

　　如果发现任何参数超差，必须立即对设备进行调试、维修或调整(如更换注射器、重新标定传感器)。维修后，必须重新进行校准，直至所有参数合格。
 

　　根据校准结果，评估设备的状态，并决定是否需要缩短下次校准周期。
 

　　三、 最佳实践与建议
 

　　建立SOP：为日常维护、定期保养和校准流程编写详细的标准操作规程，确保所有操作人员都能以一致的方式进行。
 

　　人员授权与培训：只有经过严格培训并授权的人员才能进行维护和校准操作。
 

　　实施三级维护体系：将维护分为操作员级（日常）、技术员级（周/月）、工程师级（年度），职责分明，层层递进。
 

　　数据管理与追溯：建立设备档案，将每一次的维护记录、校准证书、维修历史、消耗的备件信息等集中管理，实现全生命周期的追溯。
 

　　供应商管理：选择有实力的设备供应商和服务商，确保能获得及时的技术支持和原厂备件。
 

　　结论
 

　　样品稀释仪的维护与校准，是保障实验室数据质量的“一体两翼”。维护是“防御”，通过细致入微的保养，确保设备稳定运行，减少“非战斗减员”；校准是“校正”，通过建立量值的溯源性，确保每一次移液、每一次稀释都有据可依，捍卫了数据的准确性和完整性。将这两项工作提升至实验室核心管理工作的高度，并持之以恒地执行，是每一位负责任的实验室管理者和技术人员的必然选择，也是在日益激烈的科研竞争和严格的法规监管中立于不败之地的根本保障。